抑菌圈主要與藥敏試驗有關(guān)，是利用待測藥物在瓊脂平板中擴散使其周圍的細菌生長受到抑制而形成透明圈，即抑菌圈。通過抑菌圈大小可以判定待測藥物抑菌效價。那么怎樣才能出現(xiàn)明顯的抑菌圈呢，下面我們來具體說說。
產(chǎn)生抑菌圈的方法主要有紙片擴散法(K-B法)、牛津杯法和打孔法三種。以教學(xué)中比較常做實驗的K-B法為例，先了解一下哪些因素會影響試驗結(jié)果，再針對性地解決，使得到明顯的抑菌圈。
1.藥敏紙片：紙片選用直徑6.00~6.35mm，吸水量為20ul的專用藥敏紙片。紙片的選擇會影響藥物擴散和細菌生長。含藥紙片一般密封貯存在2~8℃，不超過一周，所以使用前應(yīng)當(dāng)提前從冰箱取出平衡室溫至少10min后再打開，避免因冷凝水影響藥效，影響結(jié)果。
2.菌液：配制菌液的前提是保證菌液的純度，以免混入其他菌；另外濃度的配制一般是選擇麥氏比濁法，調(diào)成0.5麥氏單位的標準菌液濃度。所以配制濃度時應(yīng)當(dāng)嚴格對照，濃度太高或太低對實驗有影響。
3.培養(yǎng)基：選擇水解酪蛋白培養(yǎng)基(M-H)，為兼性厭氧菌和需氧菌藥敏試驗標準培養(yǎng)基，一般4℃保存。
以上的材料準備，如果是學(xué)校的實驗課程，一般有的實驗老師會直接幫忙準備好。
4.細菌接種：用無菌棉拭子蘸取已校正濃度的菌液，在管壁擠掉多余菌液。涂布整個培養(yǎng)基表面，每次將平板旋轉(zhuǎn)60°，涂抹三次，較后沿周邊擦繞兩圈，以保證菌液涂抹均勻。這樣才能使使抑菌圈顯現(xiàn)明顯，試驗結(jié)果不會出現(xiàn)較大的偏差。
5.貼藥敏片：涂菌后放置15min使平板上的水分被瓊脂*吸收后，才能貼藥敏紙片。這個時間不能過長，否則會使細菌產(chǎn)生耐藥。
①貼藥敏紙片時，每取一種藥敏紙片必須燒一下鑷子口，避免藥敏紙片之間相互混淆，以提高藥敏的準確性。
②兩紙片之間距離不小于24mm，紙片距平板邊緣不小于15mm，以免得到的抑菌圈交叉或者不完整。
③紙片貼后不可再拿起，放下后輕壓使藥敏紙片貼合在平板上。可以在還未貼之前在培養(yǎng)基底部量好距離，確定好紙片放置位置。
④將平板翻轉(zhuǎn)放置。
6.恒溫箱培養(yǎng)：35℃恒溫箱培養(yǎng)18~24小時。放置的時候記得放置平穩(wěn)。
整個流程里面比較會影響實驗結(jié)果的就差不多這些了，任何實驗都存在不可控的誤差，只有操作得當(dāng)，結(jié)果才能更好。
以上方法可以出現(xiàn)較明顯的抑菌圈，希望能幫助大家更好地進行實驗。
更新時間：2024-04-15 
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